พิพิธภัณฑ์ประวัติศาสตร์ธรรมชาติแห่งอเมริกาจะจัดการผจญภัยค้างคืนสำหรับผู้ใหญ่เท่านั้นที่เป็นที่นิยมอย่างมากอีกครั้ง สร้างขึ้นจากโปรแกรมค้างคืน A Night at the Museum ที่ประสบความสำเร็จ ผู้ใหญ่อายุ 21 ปีขึ้นไปจะได้เพลิดเพลินกับกิจกรรมยอดนิยมเวอร์ชันที่ซับซ้อนยิ่งขึ้น การผจญภัยข้ามคืนจะเริ่มต้นด้วยการต้อนรับด้วยแชมเปญและดนตรีที่จัดเตรียมโดยวงดนตรีแจ๊สกลางคืนครั้งที่ 12 ในหอรำลึก Theodore Roosevelt นักสำรวจสามารถคาดหวังว่าจะได้เดินเตร่ผ่านห้องโถงที่เกือบจะว่างเปล่าของพิพิธภัณฑ์ ซึ่งพวกเขาอาจบังเอิญเจอฝูงช้างใน Akeley Hall of African Mammals หรือเผชิญหน้ากับโครงกระดูกไดโนเสาร์ รวมถึง Tyrannosaurs อายุ 65 ล้านปี เร็กซ์